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诺如病毒分子检测方案

发布时间:2017-03-23 点击量:815

诺如病毒是什么?

诺如病毒是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒,诺如病毒感染性腹泻在*范围内均有流行,全年均可发生感染,寒冷季节呈现高发,学龄儿童是成为备受诺如病毒“宠幸”的对象。

需要注意的是,诺如病毒至今仍没有疫苗和药物!

 

诺如病毒的传播途径

1.可通过污染的食物、水源、物品、空气等传播。
2.食源性传播是通过食用被诺如病毒污染的食物进行传播,牡蛎等贝类海产品和生食的蔬果类是引起诺如暴发的常见食品。
3.经水传播可由桶装水、市政供水、井水等饮用水源被污染所致。

我国对诺如病毒的监测工作

1.我国卫生部门于2005年启动了病毒性腹泻监测工作,在部分省市开展了生食动物性水产品中诺如病毒的常规监测,以进一步了解我国病毒性腹泻流行病学规律、流行毒株特征,为制定有效的预防控制措施提供科学依据。
2.食品药品监管总局2014年和2015年都将诺如病毒作为检验项目纳入食品安全抽检计划,进一步加强监管工作。

 

诺如病毒的检测方法

1.电镜法 
包括直接电镜法(EM)和免疫电镜法(IEM)。
设备昂贵;灵敏度与特异性相对较低;对操作人员的专业性要求较高;
2.免疫法 
包括放射免疫法(RIA)、生物素-亲和素免疫法(Biotin-Avidin Immunoassy)和酶联免疫法(ELISA) 。
RIA的灵敏度要比IEM高10-100倍,但需要使用放射元素进行标记,且需要时间较长(6d);Biotin-Avidin Immunoassy是美国疾病预防控制中心基于RIA建立的简化方法,灵敏度与RIA相近;ELISA具有灵敏度高、耗时少、经济的优点,便于广泛推广,但株型特异性太强,应用范围较狭窄。
3.分子生物学检测方法
包括等温核酸扩增(NASBA)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、荧光染料RT-PCR、荧光探针RT-PCR、多重RT-PCR等,是目前检测诺如病毒应用比较广泛的方法,被称为检测诺如病毒的“金标准”。

GB 4789.42-2016《食品安全标准食品微生物学检验 诺如病毒检验》中规定了食品中诺如病毒(Norovirus)的实时荧光RT-PCR检测方法。

实时荧光RT-PCR检测法的优势

荧光探针RT-PCR通过特异性的荧光探针与引物,可实时监控反应过程中特异性产物的变化,并且可以实现同一管中多个基因的检测(多重),特异性较好,假阳性率低,检测灵敏度可达10-100拷贝/反应。

旋达R1诺如病毒核酸检测试剂

PCR-荧光探针法参照GB 4789.42-2016开发
产品家族
012111M/L   诺如病毒GⅠ核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
012121M/L   诺如病毒GⅡ核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
012112M/L   诺如病毒GⅠ核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
012122M/L   诺如病毒GⅡ核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
012132M/L   诺如病毒GI型、GII型核酸检测试剂盒(双色荧光探针法)

 

产品特点
操作简单、快速判读
特异性强、灵敏度高

适用仪器
恒温荧光法适用:ZYD-S1、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308c等恒温荧光检测仪, ABI 7500,LightCycler480,CFX 96等荧光PCR仪。
PCR-荧光探针法适用:ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列、博日系列以及其它荧光定量PCR 检测仪(可同时检测FAM通道(494 nm)、VIC通道(538nm)、NED通道(546nm)三种通道的荧光定量PCR仪)。

产品性能指标
阳性参考品符合率:企业阳性参考品检测结果应全部为阳性,阳性率为10/10;
阴性参考品符合率:企业阴性参考品检测结果应全部为阴性,阴性率为10/10;

产品应用
国家、地方食品药品监督管理单位对抽样食品中潜在的诺如病毒污染进行快速检测
出入境检验检疫部门对进出口食品中诺如病毒的潜在污染情况进行快速检测与筛查
食品生产加工企业对产品中潜在诺如病毒的污染情况进行快速检测与筛查
重大活动中的食品安全保障
食品安全突发事件的快速检测等

 

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