核酸提取仪的校准规范

　　核酸提取仪校准是保障分子检测结果准确、满足CNAS/CMA实验室评审要求的核心计量溯源环节，以下是覆盖法规依据、核心项目、操作流程、周期管理的完整标准化校准规范。
 

　　核酸提取仪标准化校准操作流程：

 

　　‌校准前准备‌
 

　　环境控制在18~25℃、相对湿度40%~70%，无强气流与电磁干扰；准备经计量检定合格的标准温度巡检仪(精度≤±0.1℃)、秒表、超微量分光光度计、定值标准DNA样本。
 

　　‌温度校准‌
 

　　按孔位数量布置测点：96孔位选7个测点、32孔位选5个测点、16孔位选3个测点，覆盖中心孔与边缘孔；依次设置37℃、56℃、70℃、95℃校准点，待温度稳定10分钟后记录各测点数据，计算示值误差与均匀性。
 

　　‌磁珠回收效率验证‌
 

　　每孔加入200μl标准化磁珠悬液，运行1次吸附-释放程序，用分光光度计测定释放后磁珠OD值，计算回收效率，低于98%需清洁磁棒表面或调校磁组组件。
 

　　‌提取性能验证‌
 

　　用定值标准DNA样本完成全流程提取，检测产物浓度、OD260/280比值，核酸得率与参考值偏差≤20%即为合格。
 

　　‌交叉污染验证‌
 

　　96孔板仅A1孔加高浓度阳性样本，其余孔加无菌水，运行完整提取程序后qPCR检测，所有阴性孔无扩增即为合格。
 

　　校准周期管理
 

　　温控系统、定时系统：常规实验室‌12个月校准1次‌，日均样本量超100份的高通量场景缩短至6个月。
 

　　磁棒运动定位、磁珠回收效率：每3个月验证1次，更换磁棒组件、设备搬迁后需立即重新校准。
 

　　整机年度计量：每年送第三方计量机构完成全参数溯源，保留完整校准证书与原始记录，满足实验室评审可追溯要求。