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动物源性检测试剂的操作方法介绍

发布时间:2021-09-01 点击量:67
  动物源性检测试剂适用于粗品动物源性原料的掺假检测,运用配套的磁珠法试剂盒提取DNA,已提取的DNA为模板进行实时荧光PCR扩增,以实时定量检测技术,采用单重PCR方法将所用试剂配置成预混合形式组建成实时荧光PCR(猪源和反刍源)DNA检测试剂盒,其中一管是检测样本中猪基因的含量(FAM荧光) 另一管是检测样本中反刍源动物的基因的含量。
  用户只需每孔加5ul的DNA样品即可上机测试,大大提高了使用的便捷,同时减少了交叉污染的机率,避免整个试剂盒反复冻融,从而影响检测效果。
  动物源性检测试剂如何去操作呢?
  1、需要按试剂准备中描述的方法,配制好动物源性DNA检测试剂盒各种组分的工作液。
  2、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
  3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
  4、设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,样本孔加待测样本50μL,空白孔不加。
  5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。
  6、除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
  7、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。
  8、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15分钟。
  9、如此重复4次,若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20秒的程序,可以提高检测的精度;洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。

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